Посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору (нос, зев) в Москве

Посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору, определение чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам (Upper Respiratory Culture,Routine. Bacteria Identification. Antibiotic Susceptibility and Bacteriophage Efficiency testing)

Метод определения

Исследование проводят методом посева на плотные питательные среды с использованием прибора WASP, Copan, Италия. Идентификацию микроорганизмов проводят методом масс-спектрометрии с помощью прибора Microflex Brucker Daltonik MALDI Biotyper, BRUKER, Германия. Определение чувствительности к антимикробным препаратам проводят диско-диффузионным методом с использованием анализатора ADAGIO, BIO-RAD, Франция; определение чувствительности к бактериофагам — путем посева бактериальной культуры на плотную питательную среду с последующим нанесением бактериофага.

Исследуемый материал Отделяемое верхних дыхательных путей

Синонимы: Upper Respiratory Culture,Routine. Bacteria Identification. Antibiotic Susceptibility and Bacteriophage Efficiency testing.

Краткое описание исследования «Посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору, определение чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам»

Поражение носа (ринит, синусит), слизистой оболочки глотки (фарингит) нередко обусловлены бактериальной инфекцией, в основном пневмококком, стафилококом (ринит), гемолитическим стрептококком (фарингит).

Данный метод включает в себя качественное и полуколичественное бактериологическое исследование биоматериала с целью выделения и идентификации этиологически значимых микроорганизмов − возбудителей заболеваний верхних дыхательных путей − с определением чувствительности выделенных патогенов к антимикробным препаратам (антибиотикам) и бактериофагам.

Антибиотики относятся к лекарственным препаратам, эффективность которых является наиболее очевидной для лечения бактериальной инфекции. Основным ограничением эффективности антимикробных препаратов является способность микроорганизмов формировать устойчивость (резистентность) к их действию. Этот естественный процесс многократно ускоряется при необоснованном и избыточном применении антимикробных препаратов в качестве средств профилактики в медицине, средств самолечения широкими кругами населения.

Учитывая наличие указанных проблем, антимикробный препарат следует назначать только при наличии обоснованных показаний (документированная или предполагаемая бактериальная инфекция) и с учетом результатов определения чувствительности к нему выделенного возбудителя.

В ряде случаев, в условиях растущей антибиотикорезистентности, а также для пациентов, имеющих противопоказания к приему антибиотиков, актуальной альтернативой антибактериальным препаратам служат бактериофаги. В медицине используют их способность разрушать клетки болезнетворных микроорганизмов. Литическое действие бактериофагов строго специфично. В производстве фаговых препаратов учитывают специфичность бактериофагов и готовят поливалентные фаговые препараты — смеси бактериофагов, активных в отношении различных типов возбудителей. При применении бактериофаги не нарушают нормального биоценоза человека, могут применяться в комплексной терапии с другими лекарственными средствами. Бактериофаги не вызывают дисбиоз, аллергию, не подавляют иммунную систему; разрешены к применению у детей с 0 месяцев, у беременных и в период лактации. При необходимости использования бактериофагов в лечебных и/или профилактических целях необходимо проводить оценку чувствительности к ним возбудителя.

Выделяемые микроорганизмы и возбудители:

• условно-патогенные микроорганизмы: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Branchamella catarrhalis, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus; грамотрицательные бактерии семейства энтеробактерий;
• грибы рода кандида (Candida albicans и др.);
• представители нормальной флоры: зеленящие стрептококки (Streptococcus viridans group), коагулазонегативные стафилококки (Staphylococcus еpidermidis), непатогенные нейссерии (Neisseria spр.), непатогенные дифтероиды (Corynebacterium spр.), и некоторые другие.

С какой целью проводят посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору, определение чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам

Посев биоматериала проводят с целью выделения и идентификации этиологически значимых микроорганизмов − возбудителей заболеваний верхних дыхательных путей, а также для определения чувствительности выделенных патогенов к антибиотикам и бактериофагам.

Что может повлиять на результат теста «Посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору, определение чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам»

Несоблюдение правил подготовки к исследованию может повлиять на результат теста.

Литература

1. Асланов Б. И. и др. Рациональное применение бактериофагов в лечебной и противоэпидемической практике. — 2014. https://nasci.ru/?id=3378&download=1
2. Баранов А. А. Клинические рекомендации по диагностике и лечению острых респираторных заболеваний (ОРЗ), лечению пневмонии у детей. 2019. https://minzdrav.gov-murman.ru/files/Klinicheskie_rekomendatcii_ORZ.pdf
3. Белобородов В. Б. и др. Программа СКАТ (Стратегия Контроля Антимикробной Терапии) при оказании стационарной медицинской помощи. Методические рекомендации для лечебно-профилактических учреждений Москвы //Consilium Medicum. — 2017. — Т. 19. — №. 7-1. https://cyberleninka.ru/article/n/programma-skat-strategiya-kontrolya-antimikrobnoy-terapii-pri-okazanii-sionarnoy-meditsinskoy-pomoschi-metodicheskie
4. Драпкина О. М. и др. Методические рекомендации по рациональной антибиотикотерапии при инфекционных заболеваниях. — 2019. https://www.sechenov.ru/upload/iblock/12e/Metodicheskie-rekomendatsii-po-ratsionalnoy-ABT_2019.pdf
5. Клинические рекомендации. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. Версия-2018-03. https://flm.kz/files/14062184925c1281c1dfd6b.pdf
6. Козлов Р. С. и др. Клинические рекомендации. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам //М.: Расширенное совещание Межрегиональной ассоциации по клинической микробиологии и антимикробной химиотерапии. — 2014. — №. 1. — С. 154. https://metodichka.x-pdf.ru/15himiya/148495-1-metodicheskie-rekomendacii-utverzhdeni-rasshirennoe-soveschanie-mezhregionalnoy-associacii-klinicheskoy-mikrobiologii-anti.php
7. Яковлев С. В. и др. Стратегия и тактика рационального применения антимикробных средств в амбулаторной практике. Евразийские клинические рекомендации. 2016 год //Педиатрия. Приложение к журналу Consilium Medicum. — 2017. — №. 1. https://cyberleninka.ru/article/n/strategiya-i-taktika-ratsionalnogo-primeneniya-antimikrobnyh-sredstv-v-ambulatornoy-praktike-evraziyskie-klinicheskie-rekomendatsii-1
8. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 30th Edition. https://clsi.org/standards/products/microbiology/documents/m100/

Источник

Мазок из зева и носа: надежный инструмент педиатра

Мазок из зева и носа — методика, позволяющая собрать слизь и слюну, в которых обитают бактерии, вызывающие болезни, а также выявить вирусы, например, новый SARS-CoV-2. Собранный материал изучают под микроскопом, отправляют в баклабораторию или анализируют при помощи экспресс-тестов. Все это позволяет определить вид микроорганизмов из слизистой носа и глотки ребенка. Опираясь на информацию, полученную при анализе, врач ставит диагноз и подбирает правильное лечение.

Для чего назначают мазок

Если проанализировать биологический материал, полученный при помощи мазка из горла и носа, можно узнать не только о том, есть ли коронавирусная инфекция или почему у ребенка постоянно заложен нос, но и выяснить причину появления фурункулов. Бактерии золотистого стафилококка, вызывающие фурункулез, нередко проникают в организм именно через нос.

Диагнозы, которые позволяет поставить анализ мазка:

• Ангина (тонзиллит) и фарингит — болезни, которые вызывает бактерия — бета-гемолитический стрептококк из группы А. При этих заболеваниях малыш жалуется на боль в горле, страдает от заложенности в носу. Ангину нужно лечить вовремя. Через несколько недель болезнь может привести к серьезным осложнениям на почки, суставы и сердце — гломерулонефриту, ревматизму и миокардиту.
• COVID-19, новая коронавирусная инфекция, которая поражает также и детей. Анализ на коронавирус по мазку из носа может быть качественным (на антигены к вирусу) или количественным, методом ПЦР. Второй вариант предпочтительнее, а забор биоматериала одинаков: мазок из носоглотки.
• Менингит — тяжелая болезнь, которую вызывает бактерия менингококк, или Neisseria meningitidis. Это очень опасная болезнь, которая начинается с легкой заложенности в горле, и может привести к воспалению мозга, тяжелым поражениям кожи, надпочечников, почек и легких.
• Дифтерия — тяжелое заболевание, которое вызывает бактерия Corynebacterium diphtheriae. При дифтерии возникает отек носоглотки и горла, становится сложно дышать. Дифтерию важно вылечить как можно раньше, чтобы избежать осложнений — нарушения дыхания, проблем с сердцем, почками и нервной системой.
• Коклюш — нередко встречающаяся у детей и пожилых людей болезнь, которую вызывают бактерии Bordetella pertussis. При коклюше малыш страдает от болей в горле и мучительного кашля. Первые проявления коклюша похожи на ОРВИ.

Как берут мазок у детей

Во время процедуры врач усаживает ребенка лицом к свету. Если ребенок маленький, то удерживать малыша в правильном положении помогает помощник.

Затем доктор берет стерильный ватный тампон и вращательными движениями вводит его сначала в одну, а потом в другую ноздрю малыша.

Глубоко вводить тампон не нужно. Маленьким детям вводят тампон в нос на 0,5 см, а детям постарше на 1,5 см. Когда доктор закончит процедуру, тампон переносят в стерильную пробирку и закрывают.

После этого берут мазок из глотки. Это сложнее, чем взять мазок из носа, ведь врачу нужно добраться до задней стенки горла и миндалин.

Ребенка просят широко открыть рот. Затем стерильной лопаточкой (шпателем) нажимают на корень языка и стерильным ватным тампоном собирают содержимое с небных дужек и миндалин. Затем тампон также помещают в стерильную пробирку.

После того, как материал собран, его направляют в лабораторию. В зависимости от цели исследования могут наносить его на стекло и изучать под микроскопом или же применяют иные способы Если у доктора появляются подозрения, что в материале есть опасные микроорганизмы, назначают бактериологический посев.

Часть материала, полученного у ребенка, отправляют в бактериологическую лабораторию. Бактериологи помещают бактерии в идеальные для них условия и ждут, когда вырастет колония микроорганизмов.

Изучив колонию, бактериологи определяют вид бактерий и их чувствительность к антибиотикам. Это очень важная информация. Опираясь на результаты бактериологического анализа, лечащий врач ставит диагноз и назначает лечение.

Как подготовить ребенка к сдаче мазка из зева и носа

• За две недели до анализа откажитесь от системных антибиотиков. Врач, назначивший мазок, должен обязательно это учитывать.
• За 2-3 дня до анализа прекратите использовать спреи и растворы для полоскания горла, в которых содержатся антибиотики. Если пренебречь этим правилом, анализ получится недостоверным.
• За день до анализа не полоскайте горло и не промывайте нос. Нельзя пользоваться даже солевым раствором, в котором нет антибиотиков.
• За 4 часа перед мазком нельзя есть, жевать жвачку, а пить можно только чистую негазированную воду. Мазок из зева и носа сдают натощак.
• Напомните ребенку, что перед анализом нельзя чистить зубы.

Когда врач будет делать мазок, боли ребенок не почувствует, но процедура все равно не слишком приятная. Когда тампон прикоснется к горлу, возникает чувство тошноты и рвотные позывы. Если ребенок старше года, нужно его об этом предупредить и рассказать, для чего нужна процедура.

Постарайтесь успокоить малыша и объяснить, что если немного потерпеть, мазок возьмут очень быстро и без неприятных ощущений. Если малыш очень боится, можно попросить доктора разрешить посадить его на колени маме. Так ребенку будет спокойнее.

Сколько ждать результатов анализа

Время ожидания зависит от вида бактерий, которые врач высевает на питательную среду. Колонии бактерий разных видов могут расти от 3 до 5 дней.

Иногда врачи используют более быстрые методы, чем бактериальный посев: применяют антигенные тесты, «настроенные» на выявление частичек конкретных микроорганизмов, или используют ПЦР (полимеразную цепную реакцию) — анализ ДНК бактерии. Такие анализы готовы в зависмости от лаборатории и метода через 10-15 минут или на следующий день.

В современных лабораториях применяют быстрый стрептококковый тест, позволяющий выявить гемолитические стрептококки группы А. Результаты стрептококкового теста доступны уже через 15 минут после мазка.

Мазок из зева и носа: важный совет мамам

Если доктор назначил мазок, не стоит затягивать с анализом! От того, насколько качественно и своевременно будет проведен анализ, напрямую зависит диагноз и эффективность лечения малыша.

Анализ на бактерии должен назначать педиатр или лечащий врач. Это особенно важно, если ребенок уже получает антибактериальную терапию, которую перед анализом придется отменить. Тест на коронавирусную инфекцию можно сделать по желанию или же по направлению врача.

Будьте здоровы!

Использованы фотоматериалы Shutterstock

Источник

Взятие мазка из зева и носа: на дифтерию, менингит, коронавируc

Взятие мазка из зева и носа проводится с целью бактериологического и вирусологического исследования для определения возбудителя заболевания. Мазок берут при подозрении на дифтерию, менингококковую инфекцию и новую коронавирусную инфекцию COVID-19 (SARS-CoV-2). Диагностика проводится разными методами: бактериологическими и ПРЦ (метод полимеразной цепной реакции). Для медицинской сестры важно правильно взять мазок, чтобы результат исследования был достоверным.

Оглавление

• Показания и противопоказания
• Оснащение
• Алгоритм процедуры
• Хранение и отправка материала
• Правила забора проб на SARS-CoV-2

Взятие мазка из зева и носа: показания и противопоказания

Цели взятия мазков из зева и носа следующие:

• выявление возбудителя заболевания
• выявление бактерионосительства
• определение чувствительности микрофлоры ротоглотки и носоглотки к антибиотикам

Показания для манипуляции:

• ангина, в особенности — при наличии патологического выпота на миндалинах
• паратонзиллит
• паратонзилляный (заглоточный) абсцесс
• инфекционный мононуклеоз
• стенозирующий ларингит, ларинготрахеит
• подозрение на носительство стрептококковой и стафилококковой инфекции
• подозрение на дифтерию
• контакт с больным дифтерией
• подозрение на коклюш
• контакт с больным коклюшем
• подозрение на менингит
• контакт с больным менингитом
• подозрение на коронавирусную инфекцию
• контакт с больным COVID-19

Противопоказания:

абсолютных — нет. Относительные:

• невозможность открыть рот
• травмы, ожоги лица
• анатомический дефект костей черепа
• геморрагический диатез в тяжелой форме

Оснащение для проведения манипуляции

Для взятия мазка из зева и носа необходимо подготовить:

• средства индивидуальной защиты (СИЗ) для медицинского работника — одноразовый дополнительный халат, шапочка, маска или респиратор, защитные очки или щиток, двойные перчатки
• бланк направления на исследование
• штатив для пробирок
• стерильные зонды-тампоны
• пробирки с транспортной средой
• стерильный шпатель
• стеклограф или нестираемый маркер
• емкости с дезинфицирующими растворами

Набор для взятия мазка

Перед выполнением процедуры следует подготовить набор для забора мазка. Тип микроорганизма и планируемый тест определяют тип зонда-тампона и субстрата.

Для забора материала для исследования методом ПЦР следует использовать только зонды-тампоны с синтетическим волокном, намотанным на пластиковый стержень (другие могут вызвать ингибирование ПЦР). Нельзя использовать зонды-тампоны из органическим материалов (напр. хлопка, дерева) или с альгината кальция, поскольку они могут ингибировать ПЦР.

Кроме того, при взятии мазка в направлении коклюша не следует использовать хлопковые тампоны или тампоны из искусственного шелка (района). Полиэстеровые, дакроновые или нейлоновые тампоны на пластиковом стержне, вероятно, являются универсальными. На стержне зонда-тампона имеется: заводская отметка глубины, на которую он должен быть вставлен, и сужение, на котором его следует сломать после опускания в пробирку.

В случае диагностики на наличие SARS-CoV-2 можно использовать:

1. коммерческие наборы — содержат гибкий флокированный пластиковый зонд и пробирку с вирусологической средой
2. наборы home made (для мазков из горла и носа), содержащие:

• стерильные флокированные или стандартные пластиковые зонды-тампоны с тампонами из дакрона, вискозы или искусственного шелка
• пробирки со стерильным забуференным 0,9 % раствором NaCl в объеме, позволяющем погрузить конец зонда-тампона (рис. 1).

Рисунок 1. A — оборудование, необходимое для приготовления набора home made: 1 — игла для набирания 0,9 % раствора NaCl, 2 — шприц, 3 -небольшая упаковка с 0,9 % раствором NaCl (следует использовать небольшие упаковки, чтобы избежать контаминации раствора при его многократном использовании), 4 — зонд-тампон, 5 — пробирка. Б — 0,9 % раствор NaCl должен быть набран в шприц в асептических условиях. В — примерно 1 мл раствора следует налить в пробирку, в которую после взятия мазка будет помещен зонд-тампон

Перед взятием мазка следует описать пробирку, в которую будет помещен зонд-тампон, и наклеить на нее код (если требуется; рис. 2).

Рисунок 2. Описание и приклеивание кода на пробирку. На пробирке должна быть указана следующая информация: имя и фамилия пациента, дата рождения, дата и время взятия мазка

Взятие мазка из зева и носа: алгоритм

При заборе материала важно! правильно держать зонд — между большим пальцем и остальными пальцами кисти, взяв его в руку, как писчее перо:

• Вымыть руки гигиеническим способом
• Надеть средства индивидуальной защиты
• Представиться пациенту
• Идентифицировать личность пациента
• Убедиться в наличии информированного согласия на проведение процедуры
• Объяснить пациенту цель и ход процедуры
• Заполнить бланк направления на исследование
• Промаркировать пробирки
• Предложить пациенту удобно сесть лицом к источнику света

Взятие мазка из зева

Материал из зева и ротоглотки на дифтерию, коклюш, коронавирус, менингит, стафилло- и стрептококки следует забирать натощак и до приема лекарств либо не ранее, чем через 2 часа после приема пищи. Методика следующая:

• Попросить пациента слегка запрокинуть голову
• Взять в левую руку пробирку со стерильным влажным зондом и стерильный шпатель
• Попросить пациента открыть рот
• Левой рукой надавить на корень языка, правой — извлечь из пробирки стерильный зонд
• Не касаясь зубов, слизистой языка и щёк, вращательными движениями провести зондом по дужкам и миндалинам, при необходимости — задней стенке ротоглотки. При взятии мазка на коклюш, коронавирус, менингит, носительство стрептококковой и стафилококковой инфекций — обязательно с задней стенки ротоглотки! Если имеются налёты — провести по границе здоровой и пораженной ткани, слегка нажимая на них зондом
• Извлечь зонд и сразу поместить его в пробирку, не касаясь её стенок

Взятие мазка из носа

• Попросить пациента очистить носовые ходы и слегка запрокинуть голову
• Взять в левую руку пробирку с сухим зондом, правой — извлечь сухой зонд из пробирки
• Передний назальный мазок. Легким вращательным движением ввести зонд в левый носовой ход по наружной стенке носа на глубину 1-3 см до нижней носовой раковины. Не касаться кожи крыльев носа!
• Назальный мазок с задней стенки глотки. Применяется при заборе материала на SARS-CoV-2 (возбудитель коронавирусной инфекции). Техника меняется. После введения зонда на 1-3 см зонд слегка опустить книзу, аккуратно ввести под нижнюю носовую раковину до задней стенки носоглотки (на 3-4 см у детей и 5-6 см у взрослых). Извлечь зонд также вращательными движениями.
• Не касаясь краёв пробирки, поместить в нее зонд.

Взятие мазков из зева и носа на SARS-CoV-2 осуществляется специальными зондами. После забора материала конец каждого зонда отламывают и помещают в микропробирку типа эппендорф. Важно! Оба зонда — с материалом как из ротоглотки, так и из носоглотки — помещают в одну пробирку с крышкой для большей концентрации вирусов.

Отправка материала в лабораторию

Пробирки помещают в термос или термоконтейнер с хладоэлементами. Температура хранения материала — от +2ºC до +8ºC, время хранения — до 24 часов.

Пробирка должна быть правильно упакована. Правила упаковки образцов должны соответствовать 2-му уровню биологической безопасности (BSL2), а контейнеры должны быть упакованы и описаны в соответствии с принципами для агентов, вызывающих заболевания у людей. Применяется принцип тройной упаковки (1 — основной контейнер, 2 — вторичная упаковка, 3 — внешняя упаковка).

Наружная поверхность основного контейнера должна рассматриваться как контаминированная, поэтому ее следует помещать во вторичную упаковку таким образом, чтобы минимизировать риск контаминации вторичной упаковки. В зависимости от процедур, используемых в данном учреждении, и количества людей, принимающих участие в заборе мазка и упаковке образцов, отдельные этапы процедуры могут отличаться. Например, если образцы берут в доме пациента и всю процедуру выполняет только один человек, то перед тем, как поместить основной контейнер во вторичную упаковку, он должен покинуть дом пациента, деконтаминировать руки, снять внешние перчатки и внешний халат, снова деконтаминировать руки, надеть новую пару перчаток, продезинфицировать их, поместить основной контейнер во вторичную упаковку, плотно закрыть ее, продезинфицировать руки, а затем внешнюю поверхность вторичной упаковки.

Вторичная упаковка должна содержать абсорбирующий слой, который будет абсорбировать жидкость при разгерметизации пробирки.

Направления, прикрепленные к образцам, не могут быть помещены во вторичную упаковку, но они должны быть помещены в запечатанный конверт, прикрепленный к внешней упаковке.

Надеемся, взятие мазка из зева и носа не вызовет у вас трудностей, а станет легко выполняемым навыком, которым должна владеть каждая медицинская сестра.

Правила забора материала на SARS-CoV-2 (презентация)

СКАЧАТЬ ПРЕЗЕНТАЦИЮ

Источники:

• https://mosgorzdrav.ru/
• https://empendium.com/

Источник